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濟(jì)南來寶科學(xué)儀器有限公司
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非洲豬瘟檢測設(shè)備及儀器使用說明
2019-5-20 閱讀(1253)
非洲豬瘟檢測設(shè)備及儀器使用說明
非洲豬瘟從2018年年底至今一直是大家關(guān)注的熱點，許多大型的屠宰產(chǎn)，和當(dāng)?shù)氐恼畽C(jī)構(gòu)，都將及時發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟，及時檢測出非洲豬瘟，及時將非洲豬瘟疫情控制住，減少人民和企業(yè)的損失作為重點工作，本公司提供非洲豬瘟檢測的相關(guān)設(shè)備并且提供配套的試劑盒和相關(guān)的檢測說明，下面就設(shè)備清單和試劑盒檢測說明為大家呈現(xiàn)，歡迎隨時跟公司業(yè)務(wù)經(jīng)理洽談業(yè)務(wù)。
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非洲豬瘟檢測設(shè)備及儀器使用說明操作步驟
樣品處理
血液樣品直接用；淋巴結(jié)、脾臟、扁桃體樣品，用無菌的剪刀和鑷子剪取待檢樣品2.0 g于研缽中充分研磨，再加10.0 mL PBS（pH 7.2，含1萬單位*和1萬單位*）混勻（樣品不足2.0 g按1:5比例加PBS），對處理的待檢樣品置70℃，30 min滅活后，3 000 r/min，4 ℃離心5 min，取上清液，編號備用；血球粉處理同上，只不過省掉研磨步驟。
1.2 樣品存放
采集或處理好的樣品在2℃～8℃條件下保存應(yīng)不超過24 h；若需長期保存，須放置-80 ℃冰箱，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（凍融不超過3次）。
1.3 操作步驟
1.3.1 病毒DNA的提?。ㄊ褂肁盒）
（1）待檢樣品、陽性對照和陰性對照的份數(shù)總和用n表示，取n個滅菌的1.5 mL離心管，逐管編號。
（2）每管加入Buffer A 500 mL。
（3）每管分別加入已處理的待檢樣品、陽性對照、陰性對照各200 mL，充分混勻，室溫放置10分鐘。
（4）取與上述離心管等量的DNase-Free吸附柱和收集管，編號。將離心管中的溶液轉(zhuǎn)移至DNase-Free吸附柱，（為避免堵塞吸附柱，盡量不要吸懸浮雜質(zhì)）。
（5）13000 r/min室溫離心30 sec。
（6）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。
（7）吸附柱內(nèi)加入600 μL Buffer B，13000 r/min離心30 sec。
（8）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。
（9）重復(fù)步驟（7），（8）。
（10）13000 r/min空柱離心2 min，去除殘留液。
將每個吸附柱分別移入新的1.5mL離心管中，向柱*加入50 μL Buffer C，室溫靜置1 min，13000 r/min離心30 sec，離心管中液體即為模板DNA。獲得的DNA溶液，冰上保存?zhèn)溆茫ㄗ⒁馓崛〉腄NA須在2 h內(nèi)進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，若需長期保存須放置-80 ℃冰箱，但應(yīng)避免反復(fù)凍融）。
